RESUMO O objetivo deste estudo foi detectar Toxoplasma gondii no leite de ovinos leiteiros na mesorregião oeste de Santa Catarina, por meio do bioensaio (22 amostras de leite de oito ovelhas soropositivas para T. gondii - RIFI ≥256) e PCR [nos cérebros de camundongos inoculados no bioensaio e diretamente do leite (108 amostras de 42 ovelhas soropositivas (RIFI ≥64) em diferentes períodos de lactação)]. DNA de T. gondii foi detectado no cérebro de camundongos inoculados com leite das oito ovelhas (uma amostra do dia 45 e sete do dia 90 de lactação) e diretamente do leite em amostras da segunda coleta (90 dias de lactação), em cinco animais. Considerando os resultados de ambos os ensaios, de 42 ovelhas em lactação e soropositivas para T. gondii, 30,95% (13/42) dos animais apresentaram evidências da presença do parasito no leite. As amostras positivas na PCR foram sequenciadas e os resultados confirmaram ≥97% de identidade com o antígeno de membrana gene P22 de T. gondii. Os resultados mostraram que o T. gondii está presente no leite de ovelhas, o que representa uma possível fonte de infecção para os seres humanos, por meio do consumo de leite in natura e/ou de derivados, além da possibilidade de transmissão lactogênica aos cordeiros.

ABSTRACT This study aimed to detect Toxoplasma gondii in the milk of dairy sheep in the Western mesorregion of state of Santa Catarina by bioassay (22 milk samples from eight ewes seropositive; IFA ≥256) and PCR [for the detection of agent in the brains of mice inoculated on bioassay and directly from milk (108 samples from 42 seropositive ewes (IFA, ≥64) in different lactation periods)]. T. gondii DNA was detected in mice brains inoculated with milk from eight sheep (a sample of the 45th day of lactation and seven in the collection of 90th day) and directly from the milk in samples of the second collection (90 days) in five animals. Taking into account both assays, from a total of 42 ewes in lactation and seropositive for T. gondii, 30.95% (13/42) of the animals presented evidences of T. gondii presence in milk. Positive PCR samples were sequenced and the results confirmed ≥97% identity with the membrane antigen P22 gene of T. gondii. The results showed that T. gondii is present in the milk of sheep, representing a possible source of infection to humans through the consumption of milk "in natura" and/or derivatives, besides the possibility of lactogenic transmission to lambs.

RESUMO A toxoplasmose é uma zoonose de ampla distribuição, que acomete animais homeotérmicos, incluindo as aves e o ser humano. Galinhas podem ser consideradas indicadoras de contaminação ambiental. No Brasil, Toxoplasma gondii não apresenta estrutura populacional clonal (I, II e III), ocorrendo alta frequência de recombinação, o que resulta na grande diversidade genética observada. O presente trabalho teve como objetivo caracterizar geneticamente T. gondii de galinhas (Gallus domesticus) naturalmente infectadas do estado de Santa Catarina. Soros de 133 aves criadas extensivamente foram analisados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para detecção de anticorpos IgG contra T. gondii. Para o isolamento do parasito (bioensaio em camundongos), foram utilizados coração e cérebro de 30 aves que apresentaram títulos maiores que 64 na RIFI. Os isolados obtidos foram submetidos à caracterização genotípica por meio da RFLP-PCR utilizando 12 marcadores genéticos (SAG1, 5'-3'SAG2, alt.SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico e CS3). Os resultados obtidos foram classificados de acordo com os genótipos presentes no ToxoDB (http://toxodb.org/toxo/). Das 133 amostras de soros de galinha analisadas, 84 (63,16%) foram positivas, com títulos de anticorpos variando de 16 a 1024. No bioensaio, foram obtidos 11 isolados (Ck 3, Ck 32, Ck 35, Ck 56, Ck 63, Ck 89, Ck 102, Ck 103, Ck 125, Ck127 e Ck 128). A análise genotípica revelou a presença de seis genótipos, três dos quais classificados como #26, #53 e #120, e três, NEO1, NEO2 e NEO3, não descritos anteriormente. Nenhuma linhagem clonal I, II ou III foi encontrada. O presente trabalho confirma a ampla diversidade genética do parasito observada no Brasil.

ABSTRACT Toxoplasmosis is a widespread zoonosis that can infect warm-blooded animals including birds and humans, and chickens are considered to be indicators of environmental contamination. In Brazil, Toxoplasma gondii has a non-clonal population structure composed of three lineages (I, II, and III), presenting high recombination, and resulting in wide genetic diversity. This study aimed to genetically characterize T. gondii isolates from naturally infected chickens (Gallus domesticus) in Santa Catarina state, southern Brazil region. Sera from 133 free-range chickens were analyzed by an immunofluorescence assay (IFA) to detect IgG antibodies against T. gondii. Brain and heart from 30 positive animals, based on IFA (≥ 1:64), were used to isolate the parasite using a mouse bioassay. Strain genotyping was performed by PCR-RFLP using 12 genetic markers (SAG1, 5´-3´SAG2, alt. SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico, and CS3). The results were classified according to the genotypes based on the ToxoDB (http://toxodb.org/toxo/). Of 133 chicken sera analyzed, 84 (63.16%) were positive, with antibody titers ranging from 16 to 1024. Eleven isolates were obtained from mouse bioassay (Ck3, Ck32, Ck35, Ck56, Ck63, Ck89, Ck102, Ck103, Ck125, Ck127, and Ck128). Genotyping revealed six genotypes; three were classified as #26, #53, and #120, and three (NEO1, NEO2, and NEO3) were had not been previously described. No clonal lineages of type I, II, or III were identified. The present study confirms the high genetic diversity of T. gondii in Brazil.

A realização deste trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia do fipronil em Rhipicephalus (Boophilus) microplus, durante e após 14 tratamentos, no período de dezembro de 2006 a abril de 2009. O experimento foi realizado em uma propriedade rural do município de Lages, SC, utilizando-se 20 bovinos mestiços charolês mantidos em campo nativo, naturalmente infestados com R. (B.) microplus. A cada 14 dias, foram realizadas contagens das fêmeas de carrapato, maior ou igual a 4,5mm. Os animais foram tratados com fipronil 1mg/kg via pour on, quando a média do número de carrapatos foi igual ou superior a 40 fêmeas. Ao final do experimento, para análise da eficácia do fipronil 1%, foi realizado o teste de estábulo, utilizando 10 animais infestados com larvas provenientes de teleóginas coletadas de bovinos da propriedade. Os animais foram randomizados, de acordo com a produção inicial de teleóginas, estabelecendo-se dois grupos: controle (n=5) e tratado (n=5). A redução da média do número de fêmeas de R. (B.) microplus nas contagens após tratamentos foi de 100% nos três primeiros, com um leve declínio até o sexto tratamento. No sétimo tratamento a redução foi de 91,3%. Ao final do experimento a eficácia do fipronil 1%, avaliada pelo teste de estábulo, na redução do número de teleóginas, foi de 79,3%. A porcentagem média de inibição de reprodução calculada foi de 22,47%. Concluiu-se que, após seis tratamentos com fipronil, média de um a cada 2,7 meses, o princípio ativo deve ser substituído e que, após 14 tratamentos, o R. (B.) microplus adquiriu resistência parcial a esse carrapaticida.

This study aimed to evaluate the effectiveness of fipronil in Rhipicephalus (Boophilus) microplus during and after 14 treatments from December 2006 to April 2009. The experiment was performed on a rural property in the city of Lages/SC, using 20 crossbred Charolais cattle maintained on open pasture naturally infected with R. (B.) microplus. Every 14 days, tick counts of the females greater than or equal to 4.5mm were conducted. When tick counts averaged 40 females or more the animals were treated with applications of a 1% applied to the dorsal formulation of fipronil 1mg/kg. At the end of the experiment, barn testing was performed on 10 animals infested with larvae of the Engorging females collected from the cattle on the property, for analysis of the effectiveness of 1% fipronil. The animals were randomized according to the initial production of Engorging females, establishing five animals in the control group and five in the treated group. The reduction in the average number of females of R. (B.) microplus was 100% during the first three treatments, with a slight decline up to the sixth treatment. On the seventh treatment the reduction was 91.3%. At the end of the experiment the effectiveness of 1% fipronil for reducing the number of ticks was 79.3%, assessed by the barn testing. The average percentage of inhibition of reproduction was calculated at 22.47%. It was concluded that after six treatments with fipronil, with an average of one treatment every 2.7 months, there must be a change in the active ingredient and that after 14 treatments R. (B.) microplus acquired partial resistance to this acaricide.

Bactérias do gênero Rickettsia são agentes da Febre Maculosa Brasileira (FMB), uma doença zoonótica, de difícil diagnóstico, rápida evolução e que pode levar o indivíduo à morte. Anticorpos contra Rickettsia spp. em equinos foram pesquisados, por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI≥64), em 150 amostras de sangue colhidas de animais em duas mesorregiões de Santa Catarina (Planalto Serrano e Vale do Itajaí). A ocorrência de anticorpos contra Rickettsia spp. observada em equinos de duas mesorregiões de Santa Catarina foi de 18,66%, ocorrendo reações cruzadas em todas as amostras positivas para, no mínimo, duas das espécies testadas. Isoladamente, de acordo com as espécies, 25 (16,66%) amostras foram positivas para R. rickettsii, 15 (10%) para R. parkeri, 22 (14,66%) para R. amblyommii, 23 (15,33%) para R. rhipicephali, 16 (10,66%) para R. bellii e 19 (12,66%) para R. felis. Somente dois animais resultaram em um sorodiagnóstico conclusivo, um para Rickettsia bellii e outro para R. rickettsii, nas diluições máximas de 1:4096 e 1:512, respectivamente. A ocorrência de anticorpos contra Rickettsia spp. em equinos de duas mesorregiões de Santa Catarina indica a circulação de agentes da FMB nestes animais sentinela e ratificam a importância do estudo da febre maculosa no estado de Santa Catarina.

Bacteria of the Rickettsia genus are agents of Brazilian Spotted Fever (BSF), a zoonotic disease which is difficult to diagnose, evolves quickly and can result in death. Antibodies against Rickettsia spp. in horses were studied, by means of Indirect Immunofluorescence Assay (IFAT ≥64), in 150 blood samples taken from animals in two Santa Catarina mesoregions (Planalto Serrano and Vale do Itajaí). The overall occurrence of Rickettsia spp. antibodies in horses was 18.66%, with cross-reactivity occurring in all positive samples for at least two of the species tested. Separately, according to the species, 25 (16.66%) samples were positive for R. rickettsii, 15 (10%) for R. parkeri, 22 (14.66%) for R. amblyommii, 23 (15.33%) for R. rhipicephali, 16 (10.66%) for R. bellii and 19 (12.66%) for R. felis. Only two animals resulted in a conclusive serodiagnosis, one for R. bellii and the other for R. rickettsii, at maximum dilutions of 1:4096 and 1:512, respectively. The occurrence of antibodies against Rickettsia spp. in horses from two mesoregions in the state of Santa Catarina indicates the movement of BSF agents in these sentinel animals and confirms the importance of studying spotted fever in the state of Santa Catarina.

Identificaram-se os fatores de risco e a ocorrência de anticorpos contra Neospora caninum em cães das cidades de Lages e Balneário Camboriú, SC. Amostras de soro de 400 cães domiciliados (200 de cada município) foram processadas para a detecção de anticorpos contra N. caninum pela técnica de imunofluorescência indireta. Informações acerca dos fatores de risco foram obtidas por meio de questionário. Dos 400 cães, 49 (12,3%) apresentaram anticorpos contra N. caninum. Em Lages, 26 (13%) foram positivos para N. caninume; em Balneário Camboriú, 23 (11,5%). Não foram observadas diferenças estatísticas entre as ocorrências de anticorpos contra N. caninum (P= 0,647) nas duas cidades. Das variáveis analisadas, somente idade apresentou associação (P=0.020, odds ratio= 2.557, IC 95%, 1.16-5.64) com a freqüência de cães reagentes ao N. caninum. Dentre os animais positivos, 41 (83,7%) eram adultos, indicando ocorrência de infecção pós-natal do agente.

The authors confirm the presence of one female and two males of Amblyomma aureolatum and five females and one male of A. ovale parasitizing southern brown howler monkeys in the municipalities of Indaial, Blumenau, Garuva, and Jaraguá do Sul, Santa Catarina State, Brazil.